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如何判斷緩衝液的好壞 ?需要具備哪些特點

發布時間 :2020-3-31 訪問人數 :1939

緩衝液(Buffer solution)通常是由「弱酸及其共軛堿」或「弱堿及其共軛酸」緩衝對所組成的溶液 ,能夠在加入一定量其他物質時減緩 pH 的改變 。下麵就具體來了解一下關於緩衝液的相關知識 。

什麽是緩衝液
緩衝液是一種含有共軛酸/堿對的水溶液 。 緩衝液的 pH 值範圍根據其 pKa 值決定 。該 pKa 值定義為 50% 的分子為酸式結構 ,50% 為堿式結構時的 pH 值 。關於緩衝液的一個常規原則是 ,其 pH 值應保證在 pKa 值左右 1 pH 值單位範圍內 ,從而保證其具有良好的緩衝能力 。如此可以保證同時有足夠的以酸式結構和堿式結構存在的分子在加入 H+ 或者 OH- 時可以將它們中和 。這樣 ,緩衝液就可以防止 pH 變化導致的蛋白質穩定性改變 。

好的緩衝液須具備的特點
1 、水溶性
2 、化學穩定性
3 、在所需 pH 範圍內良好的緩衝能力
4 、與分析和實驗應用條件具有良好的兼容性
5 、與其他溶質具有良好的兼容性

很多物質都可以用於生物緩衝液 。常使用的緩衝液成分通常具有接近中性的 pKa 值 ,可在生理 pH 值範圍左右使用 。表1 列出了4 種常用的生物緩衝液 、各自的 pH 值應用範圍及各自可能對蛋白質純化過程產生影響的優缺點 。為保證足夠的緩衝能力 ,這些緩衝液的濃度通常為 25mM 。

蛋白質純化中常用的生物緩衝液 。緩衝液在一定 pH 值範圍內可保持它們的緩衝能力 ,部分緩衝液成分會對某些層析過程或者分析實驗造成影響 。

緩衝溶液的作用
緩衝溶液的作用是在有限的範圍內調整溶液的 pH 值使待測溶液的酸度符合分析方法所規定的範圍 ,例如 ,苯-酚在堿性介質及鐵氰 hua 鉀存在下 ,可與 4- 氨基安替比林反應生成橙紅色的安替比林染料 ,為了防止芳香胺類的幹擾以 pH 100.2 時為適宜 。為此 ,就需要在待測溶液中加入氨一氯化錢緩衝溶液調整和控製待測溶液的 pH 10.00.2 。

在實際工作中有些分析人員由於不大了解緩衝溶液的作用機理 ,當所配製和使用的緩衝溶液與規定的數值不相符時 ,為使緩衝溶液達到要求 ,就用鹽酸或氫氧-化鈉等強酸 、強堿進行調節 ,以為這樣做可以使緩衝溶液盡快達到所需要的 pH 值 ,然而 ,結果卻適得其反 ,這樣的溶液 pH 值雖然調對了 ,可是它的緩衝體係卻被破壞了 ,作用也就失去了 ,緩衝溶液一般都是由弱酸及其弱酸鹽或是弱堿及其弱堿鹽組成的一對共軛體 。

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