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新型冠狀病毒檢測技術
從方法學原理來看 ,產品整體上可以將試劑盒分為免疫診斷與核酸檢測兩大類 :酶聯免疫 、免疫膠體金 、化學發光 、熒光定量PCR(主要技術) 、數字PCR 、 高通量測序 、恒溫擴增 。
1. 免疫診斷
是應用抗原-抗體特異性結合原理 ,使用特定標記物進行分析檢測的技術 。適合基層開展規模檢測 ,故建議將免疫檢測技術應用於基層的大範圍初篩 ,之後再以核酸檢測進行確診 。
1.1酶聯免疫吸附試驗(ELISA)
敏感性高 ,特異性較強 ,既可檢測抗體 ,又能測定可溶性抗原 。無需特殊儀器 ,且操作簡便 ,檢測成本低 ,利於普及 。人工操作 ,檢測時間較長 ,樣本檢測數量少於96例 ,易造成汙染 ,此技術很適合基層檢測機構開展大規模篩查 。
1.2 化學發光技術(CLIA)
目前最先進的免疫檢測技術之一 ,具有靈敏度高 、特異性強 、方法穩定快速 、檢測範圍寬 、操作簡單自動化程度高等優點 ;需要品牌限定的化學發光儀 ,試劑成本相對較高且無法開放通用 。
1.3 免疫膠體金標記技術(ICS)
操作簡單 、反應快速(通常數分鍾即可判讀結果) 、敏感度高 ,但由於其靈敏度較差 、無法定量檢測等弱點 ,限製了其應用範圍 ,更適用於床旁檢測及快速篩查目的 。
2.核酸檢測 :主要指聚合酶鏈式反應 ,即通常所說的PCR檢測 。
2.1 熒光定量PCR
擴增檢測同時完成 ,自動化程度高 ,具有靈敏度高 、特異性強 、重複性好等優點 ,但使用成本通常較高 ,適合具有一定規模擁有熒光定量PCR儀的實驗室 。
2.2數字PCR
能夠對樣品的核酸分子進行絕對定量 ,具有比熒光定量PCR更高的靈敏度、特異性和精確性 。樣品通量很低 、成本昂貴 。
2.3高通量測序(NGS)
具有檢測準確 、覆蓋全麵等優勢 ,但是對人員專業要求高 、檢測成本高是其劣勢 ,另外測序數據的儲存和分析 ,數據的安全和信息隱私等問題也限製了其在臨床上的應用,目前更多用於科研領域 。
2.4恒溫擴增技術
繼PCR技術後發展起來的一門新型的體外核酸擴增技術 ,具有恒溫 、高效 、不需要特殊儀器設備等優點 ,但由於其對引物設計要求特別高 ,檢測成本高 ,且結果不太穩定等原因 ,目前尚未廣泛應用於臨床檢測 ,暫不建議用於確診試驗 。