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AMPPD發光顯色試劑盒

發布時間 :2021-7-16 訪問人數 : 2150

AMPPD發光顯色試劑盒

簡介 :

AMPPD是堿性磷酸酶的化學發光底物 ,在適宜的緩衝液中 ,隨著酶的催化水解作用 ,AMPPD分解成AMP-D ,後者發出強度很高的光信號 ,其發光的速度取決於堿磷酶的濃度 。當堿磷酶偶合到雜交的探針時 ,便可以通過此係統檢測到雜交分子的存在量 。乙醇胺可使光信號輸出更理想 。AMPPD為1 ,2-二氧環已烷衍生物 ,它是一種生物化學領域中最新的超靈敏的堿性磷酸酶底物 ,其特點 :反應速度快 ,在很短時間內提供正確可靠的結果 。在它的分子結構中有兩個重要部分 ,一個是聯接苯環和金剛烷的二氧四節環 ,它可以斷裂並發射光子 ;另一個是磷酸根基團 ,它維持著整個分子結構的穩定 。在通常情況下 ,這種化合物很穩定 。但是 ,結果有堿性磷酸酶存在 ,Dioxetane Phosphate作為酶的底物會在酶的催化一脫去磷酸根基團 ,形成一個不穩定的中間體 。這個中間體隨即自行分解(二氧四節環斷裂) ,同時發射光子 。 AMPPD發光顯色試劑盒適用於PVDF膜 ,不推薦用於硝酸纖維素膜 。

編號

名稱

PW0071

25T

PW0071

50T

Storage

試劑(A):

Dioxetane Buffer

A1: Dioxetane A

50ml

100ml

-20℃

A2: Dioxetane B

50ml

100ml

-20℃

臨用時 ,取A1 、A2混合 ,即為Dioxetane Buffer ,不可預先配製 。

試劑(B): AMPPD

2.5mg

5mg

-20℃ 避光

組成 :

自備材料 :

1、轉印了蛋白並已以抗體-酶複合物檢測過的PVDF膜

2 、Tris鹽緩衝液(TBS)

3 、透明的塑料保鮮膜

4 、蒸餾水

操作步驟(僅供參考) :

臨用前 ,取適量的A1和A2 ,混合後獲得Dioxetane Buffer 。

AMPPD溶於Dioxetane Buffer, 配製AMPPD底物溶液即為AMPPD Dioxetane Buffer(發色發光顯跡液) ,用於膜的染色 。

取適量Dioxetane Buffer洗膜 。

對於PVDF膜進行的堿性磷酸酶反應, 膜置於新鮮配製的AMPPD Dioxetane Buffer 作用 。

將膜移入適量的AMPPD Dioxetane Buffer中,浸泡(AP反應) 。

取出PVDF膜 ,滴幹水分 ,將膜正麵朝下放在一張透明的塑料保鮮膜上 ,向後折疊將膜包裹起來 ,成為不漏水的封閉體 。

在暗房中 ,將膜正麵朝下放在感光膠片上 ,曝光數秒至數小時 。

如需要 ,在室溫下以適量的TBS洗膜 。

將膜放入AMPPD Dioxetane Buffer。

10 、用蒸餾水洗膜 ,終止反應 。晾幹後拍照留永久的記錄 。

注意事項 :

PVDF膜置於膠片上後 ,不要改變位置 。

曝光時間應根據實驗情況 ,自行摸索 。

配製好的AMPPD Dioxetane Buffer ,應避光低溫保存 。

為了您的安全和健康 ,請穿實驗服並戴一次性手套操作 。

有效期 : 12個月有效 。

相關 :

編號

名稱

DH0006

蘇木素伊紅(HE)染色液

PE0081

Tris-HCl緩衝液(1.5mol/L,pH8.8)

PT0001

BCA蛋白定量試劑盒

PW0040

Western blot一抗稀釋液

PW0053

Western抗體洗脫液(堿性)

PW0060

通用顯影液

TC0713

葡萄糖檢測試劑盒(GOD-POD比色法)

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